以撒的结合的Lost人物的解锁方法有两种，以下是具体步骤：
方法一：
1. 在游戏中，进入“挑战房”，位于第四大关的初始区域。
2. 在挑战房中，会看到一个锁住的门，需要钥匙才能打开，找到钥匙后，返回挑战房，使用钥匙打开锁住的门。
3. 进入门后，会看到一个红色的水晶球，将其打破，即可解锁Lost难度。
方法二：
1. 人物以撒在基础关（第1，2层）被头顶炸弹的自爆的特定怪炸死。
2. 人物抹达拉在洞穴关（第3，4层）被自己的炸弹炸死。
3. 人物犹大被boss妈腿（第6层）“直接的”*死。
4. 人物阿萨谢尔被boss撒旦（第9层）“直接的”*死。
需要注意的是，以上方法需要玩家连续不中断地完成，而且人物的心和黑心数量也有限，玩家需要合理利用这些资源。
