猪伪狂犬病又名狂痒病,也称猪疱疹病毒病、奥其基氏病、阿捷申氏病,是一种猪和其他动物共患的急性传染病,以发热、奇痒(猪除外)、脑脊髓炎为特征性症状。成年猪常为隐性感染,可引起流产、产死胎及呼吸道症状;哺乳仔猪除了呈脑脊髓炎和败血综合征外,还可侵害消化系统。且该病可以感染人,但不引起死亡。该病在猪群中普遍存在。现将一例猪伪狂犬病的诊治情况报道如下。
1 发病情况
吉林省某养猪专业户,存栏母猪23头,存栏仔猪126头。于2015年年底引种入群,未隔离,直接混群饲养,2016年1月份起出现母猪流产及仔猪死亡现象,*母猪流产或产死胎,初生仔猪死亡,3月龄仔猪出现呼吸道症状并伴有神经症状(转圈、盲目行走),应用广谱抗菌药治疗无效,仔猪相继死亡,遂就诊。
2 病理剖检
发病猪表现为腹泻、呕吐及神经症状,剖检可见淋巴结肿大和坏死,喉头有假膜,膀胱出血,肺脏实变呈虾肉样,肝脏表面出现坏死,脾脏出血、梗死,肾脏有白色坏死点。
3 实验室诊断
3.1 细菌学检查
无菌采集病死猪的心脏、肝脏、脾脏及淋巴结等组织,接种于琼脂培养基中,于37 ℃恒温箱中培养24 h,无菌落生长,说明该病为非细菌性疾病。
3.2 血清学检查
采集发病且未接种疫苗的3头仔猪血液进行血清学检测,检测猪瘟病毒、猪细小病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病病毒的抗体。
分别采用北京世纪元亨动物防疫技术有限公司的猪瘟病毒抗体间接ELISA检测试剂盒、猪蓝耳病抗体ELISA检测试剂盒及猪圆环病毒2型抗体酶联免疫检测试剂盒(PCV20150708E),西班牙海博莱公司的猪伪狂犬gE基因抗体ELISA检测试剂盒和黑龙江省兽医科学研究所小动物实验室自建的猪细小病毒抗体间接ELISA方法。研究结果表明,仅猪伪狂犬病病毒血清抗体检测结果为阳性,其余均为阴性。
3.3 PCR检测
3.3.1 病料的处理 采集2头病死仔猪的心脏、肺脏、脾脏、淋巴结、肝脏及肾脏的病变组织,加入适量PBS缓冲液,用组织研磨器对其进行研磨,将研磨好的浆液在12 000 r/min条件下离心10 min,吸取上清液,备用。
3.3.2 DNA的提取 使用Omega公司的Viral DNA Kit,按试剂盒使用说明书对组织中的总DNA进行提取,备用。
3.3.3 RNA的提取及反转录 取匀浆后的组织0.1 g左右,加入1 mL TRIzol,室温条件下作用5 min;4℃、12 000 r/min离心5 min;取上清液,加入200 μL氯仿,振荡混匀,室温下静置5 min;4 ℃、12 000 r/min离心15 min;将上清液转移至新的离心管中,加入与上清液等体积的异丙醇,室温下静置10 min;4℃、12 000 r/min离心10 min;弃上清液,向沉淀中加入75%乙醇溶液1 mL清洗沉淀,4℃、12 000 r/min离心5 min;弃上清液保留沉淀,置于超净工作台内静置干燥,用适量的DEPC水溶解,保存,备用。
运用Prime Script公司生产的RT reagent Kit with gDNA Eraser(RR047A)进行反转录,5×gDNA Eraser Buffer 2 μL,gDNA Eraser 1 μL,RNA 8 μL,42 ℃反转录2 min。取以上溶液11 μL,加入5×Prime Script Buffer2 4 μL,Prime Script RT Enzye Mix1 1 μL,RT Primer Mix 1 μL,RNase Free H2O 4 μL。37 ℃反转录15 min,85 ℃失活5 s,于4 ℃保存,备用。
3.3.4 PCR鉴定 将待检样品进行PCR扩增。经检测,猪伪狂犬病病毒引物扩增出预期355 bp的特异性条带,其余孔均未出现条带。血清学检测结果表明,该场猪只感染了伪狂犬病病毒。
4 防治
对已发病的猪只进行隔离,对未发病猪只进行密切观察,死亡猪一律进行深埋无害化处理。对受污染的环境及时进行消毒清理,并对未发病猪只紧急接种伪狂犬基因缺失疫苗,全场猪只运用广谱抗菌药物及免疫增强剂进行预防、治疗,防止继发感染。2周后猪场病情基本得到控制。
5 小结
该猪场猪只发病症状以母猪繁殖障碍、仔猪死亡、出现神经症状为主,经细菌检测、血清学检测和病原学检测,确诊为猪伪狂犬病且无并发细菌病及其他繁殖障碍病,依据诊断结果对该场猪只进行紧急隔离、消毒、接种,有效控制了病情的发展及蔓延。
猪伪狂犬病是难根除、严重影响母猪生产及仔猪存活和健康成长的一种急性传染病,严重制约着养猪业的发展。
猪伪狂犬病传染源难以消除是本病防治的难点,近几年伪狂犬病毒基因缺失苗的应用为科学监控猪伪狂犬病的发病提供了可能,大型猪场已将监测伪狂犬病病毒抗体水平作为重要内容,但小型猪场和散养户仍不具有承担该项支出的能力。因此,做好场内自繁自养、慎重引种、先隔离再混群、把握病原源头、做好场内外衔接部分的消毒和管理也会在一定程度上防止该类传染病进场。
来 源
《黑龙江畜牧兽医》2017年第6期(下)第139-140页《一例猪伪狂犬病感染的诊治》
版权归原作者所有,向原创致敬
作者 | 侯美如 刘 宇 王 岩 秦平伟
尹 伊 史同瑞
黑龙江省兽医科学研究所
Copyright © 2024 妖气游戏网 www.17u1u.com All Rights Reserved