1.备皮方法 动物的被毛常能影响实验操作和结果的观察,因此实验中常要去除或剪短动物的被毛。除毛的方法有剪毛、拔毛和脱毛三种。
(1)剪毛:固定动物后,用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛时应注意以下几点:①把剪刀贴紧皮肤剪,不可用手提起被毛,以免剪破皮肤。②依次剪毛,不要乱剪。③剪下的毛集中放在一个容器内,勿遗留在手术野和兔台周围,以保证手术野的清洁和防止注射器等夹毛。
(2)拔毛:兔耳缘静脉注射或取血时,以及给大、小白鼠行尾静脉注射时,要用拇指、食指将局部被毛拔去,以利操作。
(3)脱毛:指用化学药品脱去动物的被毛,适用于无菌手术的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。
常用脱毛剂的配方:
硫化钠3g、肥皂粉1g、淀粉7g,加水适量调成糊状。硫化钠8g,溶于100mL水中。以上脱毛剂配方适用于家兔、大鼠、小鼠等小动物的脱毛。使用脱毛剂应事先剪短被毛,以节省脱毛剂,并减少对皮肤的刺激反应,应用时用棉球蘸脱毛剂,在所需局部涂一薄层,2~3分钟后,用温水洗去脱落的被毛,以纱布擦干局部,涂一层油脂即可。2.皮肤切开和止血(1)切开皮肤:先用左手拇指和食指绷紧皮肤,右手持手术刀切开皮肤,切口大小量度以便于手术操作为宜,但也不可过大。(2)止血:手术过程中要注意随时止血,以免造成手术视野模糊,难以分辨血管和神经,延误手术时间。止血方法视出血情况而定,若为小血管出血,可用温热生理盐水纱布按压止血;较大血管出血,须先找到出血点,用止血钳夹住,然后用线结扎;若为大血管破损,应准确迅速止血,否则失血过多,影响实验,甚至造成实验动物的死亡。实验期间,应将创口暂时闭合,或用温热的生理盐水纱布盖好,以免组织干燥。3.神经、血管分离技术 组织分离有钝性和锐性两种。钝性分离不易损伤神经和血管,常用于分离肌肉包膜、脏器和深筋膜等;锐性分离要求准确、范围小,避开神经、血管或其他脏器。(1)颈动脉分离术:暴露气管,分别在颈部左右侧用止血钳分离开肌肉,在胸头肌与胸舌骨肌之间,可看到与气管平行的颈总动脉,它与迷走神经、交感神经、减压神经伴行于颈动脉鞘内(注意颈动脉有甲状腺动脉分支)。用玻璃分针小心分离颈动脉鞘,并分离出颈总动脉3cm左右,在其下面穿两条线,一线在近心端动脉干上打一虚结,供固定动脉套管用,另一线准备在头端结扎颈总动脉。(2)迷走神经、交感神经、减压神经分离术:按上法找到颈动脉鞘,先看清3条神经走行后,用玻璃分针小心分开颈动脉鞘。迷走神经最粗,交感神经次之,减压神经最细,且常与交感神经紧贴在一起(一般先分离减压神经,图3-41)。每条神经分离出2~3cm,并各穿一条不同颜色的、生理盐水润湿的丝线以便区分。(3)颈外静脉分离术:颈部去毛,从颈部甲状软骨以下沿正中线做4~5cm皮肤切口,夹起一侧切口皮肤,右手指从颈后将皮肤向切口顶起,在胸锁乳突肌外缘,即可见到颈外静脉。用玻璃分针分离出2~3cm,下穿双线备用。(4)内脏大神经分离术:兔麻醉固定,沿腹部正中线做6~10cm切口,并逐层切开腹壁肌肉和腹膜。用温热的生理盐水纱布推腹腔脏器于一侧,暴露肾上腺,细心分离肾上腺周围脂肪组织。沿肾上腺斜外上方向,即可见一根乳白色神经(图3-42)即内脏大神经。分离清楚后,在神经下引线备用。4.插管技术(1)气管插管术:①仰位固定动物,颈前区备皮,从甲状软骨下沿正中切开并逐层分离,暴露气管。②分离并游离气管。在气管下方(食管上方)穿粗线备用。③甲状软骨下0.5cm处横向切开气管前壁,再向头端作纵向切口,使切口呈“⊥”形。④一手提线,另一手插气管套管,结扎固定(图3-43)。(2)颈总动脉插管术:①用注射器向管道系统注满肝素生理盐水,排尽气泡,检查管道系统有无破裂,动脉套管尖端是否光滑(不可太尖),口径是否合适。②尽可能靠头侧结扎颈总动脉。用动脉夹尽量靠近心脏侧夹闭颈总动脉。两者之间相距2~3cm,以备插管。③用小拇指撑起颈总动脉,用锐利的眼科剪,靠结扎处朝心脏方向剪一“V”形切口,注意勿剪断颈总动脉。④生理盐水润湿的动脉插管,从切口向心脏方向插入颈总动脉,保证套管与动脉平行,以防刺破动脉壁。插入1~0.5cm,用线将套管与颈总动脉一起扎紧,以防脱落。(3)静脉插管术:在已分离好的家兔颈静脉上,用线结扎远心端,在结扎处近心侧的静脉上朝心脏方向剪一“V”形切口,将静脉套管(带芯)向心性插入静脉,结扎固定即可。(4)膀胱插管法:自耻骨联合上缘沿正中线向上做一长约5cm的皮肤切口,再沿腹白线剪开腹壁和腹膜(勿损伤腹腔脏器),切开腹壁,将膀胱轻移至腹壁上。先用棉线结扎膀胱颈部,以阻断它与尿道的通路,然后在膀胱顶部选择血管较少处剪一纵行小切口,插入膀胱插管(或漏斗),用线结扎、固定。膀胱插管口最好正对着输尿管在膀胱的入口处,但不要紧贴膀胱后壁而堵塞输尿管口。膀胱插管的另一端用导管连接至记滴器
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