一般培养的悬浮细胞的确容易出现这个情况。我养过的悬浮细胞种类不多,就个人经验而言。
1.从复苏细胞开始,要了解细胞的生长周期,尤其是出现指数生长期的时间段。尽量将细胞控制在一个合理的培养阶段,不要贪图省力贸然将细胞培养密度调小,或者认为过一个周末多个半天不处理也没有关系;除非你已经做过生长周期的确认;
2.有些悬浮细胞在平面培养环境中,会贴服在培养表面,虽然不会像贴壁细胞一样,但也不容易飘起来,但是在不断传代中会出现贴壁越来越差的情况,这个时候需要小心控制,仅保留贴壁的细胞传代,这样细胞就可以弃上清处理,死细胞或者分化的细胞就可以去掉
3.控制传代次数,复苏与冻存的记录要清楚,否则细胞状态很不稳定。
4.分化过程中如果出现过多的变异细胞,尤其是演变成完全贴壁的细胞(出现类伪足),建议不要用了,重新复苏。
一般这样处理的细胞的培养液还是比较干净的。个人实验经验,仅供参考。