猪沙门氏杆菌病又称猪副伤寒，是由多种沙门氏杆菌引起的仔猪高死亡率的传染病，临床上常以败血症（急性）和坏死性肠炎（慢性）为主要特征。在畜牧生产中主要使用抗生素或其他抗菌药物防治该病。近几十年来，由于耐药性菌株的普遍产生，极大地增加了该病的防治难度。笔者诊治了一例猪场沙门氏杆菌病病例，现将诊治过程报道如下，以供同仁参考。
1 病例介绍
2017年4月份，黔东南州某养猪场猪发病，发病猪主要为1~4月龄仔猪。病猪食欲不振，多数体温升高到40.5~41.5 ℃，精神萎靡，寒战，喜钻垫草，眼有分泌物。下痢，粪便呈淡黄色或灰绿色，恶臭，耳根、胸前和腹下的皮肤有紫红色的斑块，发病1~4 d内死亡。据饲养员反映已经使用了氨苄西林钠、磺胺嘧啶等抗菌药物，但是效果不明显。
2 剖检病变
剖检可见脾脏肿大，呈橡皮样的暗紫色；肠系膜淋巴结呈索状肿大，部分有黄疸变化；肝脏、肾脏肿大，有出血点，盲肠、结肠壁增厚，肠黏膜覆盖腐乳状物质，剥开可见边缘不整齐的溃疡面。
3 实验室检测
3.1 细菌培养及形态观察
在盲肠内取内容物，用灭菌生理盐水稀释，取上清液在1%琼脂普通营养肉汤培养基上划线培养，24 h后可见光滑的菌落。挑取单个菌落用灭菌生理盐水稀释后做细菌涂片，并进行革兰氏染色，在显微镜下镜检，可见红色杆菌，共分离得到4株细菌（S1~S4株）。
3.2 细菌生化试验
取经过纯化培养的细菌分别接种于蔗糖、葡萄糖、甘露醇、乳糖、麦芽糖、枸橼酸盐、硫化氢、甲基红等生化管中，37 ℃培养18～24 h。结果分离的4株细菌均可发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露醇，而不能利用乳糖和蔗糖，不产生吲哚，V-P试验阴性，M.R.试验和枸橼酸盐利用试验均为阳性，均能产生H2S，符合沙门氏杆菌的生化特性。
3.3 PCR检测
按照细菌基因组提取试剂盒说明书提取病原菌DNA，以此DNA为模版使用细菌16S rRNA通用引物进行PCR扩增，引物序列：F 5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′，R 5′-ACGGCTACCTTGTTACGACTT-3′。PCR扩增体系：2×PCR Mix 25 μL，上下游引物（10 μmol/L）各1 μL，DNA模板1 μL，去离子水22 μL。PCR扩增程序：94 ℃预变性2 min；94 ℃变性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸70 s，共30个循环，72 ℃延伸3 min。阴性对照的模板为灭菌去离子水。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定，回收目的条带，进行序列测定，将所得序列在NCBI上作BLAST比对以进行同源性分析。
琼脂糖凝胶电泳结果表明，PCR扩增产物大小与预期大小相同，阴性对照未扩增出条带（见图1）。序列测定与分析结果表明，4株分离菌的序列与沙门氏杆菌的同源性高于99%，说明待检菌是沙门氏杆菌。
M.DL-2 000 Marker；1.阴性对照；2～5.待检菌。
图1 16S rRNA基因PCR产物电泳结果
4 诊断
根据流行病学特点、临床症状及剖检变化初步诊断为仔猪沙门氏杆菌病，经细菌形态学、生化试验和PCR检测，确诊为猪沙门氏杆菌感染。
5 药敏试验
通过K-B试纸法对4株分离菌株进行了药敏试验。药敏试验结果判定按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）鉴定手册2006年版进行。
分离的4株沙门氏杆菌对庆大霉素、氨苄西林和甲氧苄啶/磺胺甲唑的抑菌圈直径均为6.35 mm，表现多重耐药，对头孢曲松和环丙沙星敏感，相比之下，对环丙沙星敏感性最高。
6 治疗
根据药敏试验结果，选用环丙沙星作为首选治疗药物。防治方案：1）对患病仔猪进行隔离；2）轮换使用聚维酮碘溶液、戊二醛溶液、月苄三甲氯铵进行场地消毒；3）对患病猪每天肌肉注射盐酸环丙沙星注射液 5 mg/kg、维生素C注射液0.3 g/头，2次/d，连用3 d。同时用温水灌服清瘟败毒散，15 g/头，2次/d，连用3 d；4）对全场仔猪按环丙沙星原粉100 g、清瘟败毒散1 000 g，混合拌入500 kg饲料中，每天饲喂2次，连用5 d。5）全猪群饮水中添加电解多维。
按上述方案进行处理，猪场的疫情基本得到控制，再无猪只发病，患病猪除了少数没有来得及用药死亡外，其他基本治愈。
7 讨论
目前养殖场疫病混合感染及温和型疫病的发病率越来越高，增加了临床诊断的难度。因此，在有条件的情况下，实验室确诊是非常有必要的。本次猪场疫情通过流行病学特点、临床症状和病理剖检初步诊断为猪沙门氏杆菌病，并进一步在实验室对患猪进行病原菌分离纯化、形态观察、生化试验及16S rRNA基因序列分析，确定为沙门氏杆菌感染。
近年来许多研究结果表明，某些中草药能有效抑制病原微生物，尤其对耐药性病原微生物也有相应的抑制效果，对畜禽疫病有很好的防治作用。也有研究发现，某些中药具有降低，甚至消除细菌耐药性的作用。因此，在临床上中西药结合往往可以取得理想的疗效。猪沙门氏杆菌病主要症状为体温升高，皮肤有紫红色斑块，根据中兽医辨证理论，属于典型的热毒内盛、斑疹隐隐的温热证候。清瘟败毒散是经典的温热证方剂，主治温疫热毒、气血两燔证。有学者以清瘟败毒饮为基础方治疗高热病患猪925例，治愈率为90.5%，有效率为96.6%。也有研究报道，清瘟败毒饮具有很强的解热抗炎作用。综上所述，本次疫病防治以环丙沙星为主要药物，联合使用中药清瘟败毒散，取得了良好的临床效果。
来 源
《黑龙江畜牧兽医》2018年22期第120-121页，文章原题目：《一例猪沙门氏杆菌病的诊断与治疗》
版权归原作者所有，向原创致敬
作者 | 张 森 龙征荣 刘晓东 莘海亮
黔东南民族职业技术学院
